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N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)图片
产品货号:
YT476
中文名称:
N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)
英文名称:
N-EGFP plasmid(with CMV promoter)
产品规格:
1μg|100μg
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
pCMV-N-EGFP是的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含EGFP(增强绿色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个EGFP的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有EGFP标签的融合蛋白。利用EGFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用EGFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

pCMV-N-EGFP质粒的主要信息如下:
Feature NucleotidePosition
CMV promoter1-602
T3 promoter and T3 primer binding site620-639
EGFP677-1393
Multiple cloning site1394-1483
T7 promoter and T7 primer binding site1503-1524
SV40 polyA signal1536-1919
f1 origin of ss-DNA replication2057-2363
bla promoter2388-2512
SV40 promoter2532-2870
Neomycin/kanamycin resistance ORF205-3696
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal3697-4155
pUC origin4284-4951


pCMV-N-EGFP质粒(5003bp)的图谱如下:
N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)

pCMV-Blank的多克隆位点的详细图谱如下:
N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)

pCMV-N-EGFP中没有的酶切位点包括:
AclIAflIIAhdIAscIAsiSIBaeIBbsI
BbvCIBlpIBmgBIBsiWIBsmBIBspEIBspQI
BssHIIBstEIIBstXIBstZ17IEarIEcoNIFseI
NotINruIPflMIPmeIPmlIPpuMIPshAI
PspXISacIISapISbfIScaISgrAISmaI
SwaITspMIXcmIXmaIXmnI


pCMV-Blank中的单酶切位点包括:
NdeICA`TA,TG240
SnaBITAC|GTA346
CspCI,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN`380
NheIG`CTAG,C597
BmtIG,CTAG`C597
Eco53kIGAG|CTC653
SacIG,AGCT`C651
AfeIAGC|GCT660
AgeIA`CCGG,T664
BcgI,NN`(N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN`765
BsrGIT`GTAC,A1386
BamHIG`GATC,C1394
HindIIIA`AGCT,T1400
PstIC,TGCA`G1406
EcoRIG`AATT,C1412
EcoRVGAT|ATC1420
SalIG`TCGA,C1424
AccIGT`MK,AC1425
BglIIA`GATC,T1430
BsoBIC`YCGR,G1436
PaeR7IC`TCGA,G1436
AvaIC`YCGR,G1436
XhoIC`TCGA,G1436
XbaIT`CTAG,A1442
SpeIA`CTAG,T1448
PspOMIG`GGCC,C1454
ApaIG,GGCC`C1454
PvuICG,AT`CG1534
BclIT`GATC,A1690
MfeIC`AATT,G1783
HpaIGTT|AAC1796
MluIA`CGCG,T1919
BsaXI,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN`2080
DraIIICAC,NNN`GTG2146
SfiIGGCCN,NNN`NGGCC2805
StuIAGG|CCT2854
ClaIAT`CG,AT2873
BspDIAT`CG,AT2873
EagIC`GGCC,G2939
KasIG`GCGC,C3032
NarIGG`CG,CC3033
SfoIGGC|GCC3034
PluTIG,GCGC`C3032
MscITGG|CCA3115
PflFIGACN`N,NGTC3151
Tth111IGACN`N,NGTC3151
BsrDIGCAATG,NN`3264
RsrIICG`GWC,CG3549
BstBITT`CG,AA3715
BsaIGGTCTCN`NNNN,4022
ApaLIG`TGCA,C4637
PciIA`CATG,T4951


pCMV-N-EGFP质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
N-EGFP primer (1284-1303):5'-GCACCCAGTCCGCCCTGAGC-3'
T7 primer (1503-1524):5'-GTAATACGACTCACTATAGGGC-3'

pCMV-N-EGFP的全序列信息:
YT476 pCMV-N-EGFP全序列

pCMV-N-EGFP质粒转染细胞后的表达效果请参考下图:
N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)
pCMV-N-EGFP质粒转染细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。

使用说明:
1.首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1mL。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3.pCMV-N-EGFP质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
相关搜索:N端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)pCMV-N-EGFPN-EGFP plasmid(with CMV promoter)
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